分光光度計檢定（測試）

一、 主要專案對分析結果的影響

1）波長準確度

分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應於樣品吸收光譜中的某一個吸收峰的波長。由於儀器的製造和調整誤差，單色光的實際波長與儀器的波長讀數值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度，對波長準確度要求允許寬些。但是，當吸收峰寬度較小，而且吸收峰兩側邊緣比較陡直，此時波長準確度的影響就必須引起注意。

2）透射比（吸光度）準確度

很顯然，透射比或吸光度的誤差越大，測試結果的可信性越差，從而影響到測試資料的準確性。

3）雜散光

雜散光是由於光學元件製造誤差以及光學和機械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光，隨著樣品濃度的增加，雜散光的影響也隨之增大，將給分析結果帶來一定的誤差。在紫外的短波區域光源強度和檢測器的靈敏度均明顯減弱，雜散光的影響更不能忽視。因此，雜散光的大小也是儀器效能的一項重要指標。

使用與維護

1）若大幅度改變測試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡後，重新校正“0”和“100%”點。然後再測量。

2）指標式儀器在未接通電源時，電錶的指標必須位於零刻度上。若不是這種情況，需進行機械調零。

3）比色皿使用完畢後，請立即用蒸餾水沖洗乾淨，並用乾淨柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。

4）操作人員不應輕易動燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。

5）WFZ800-DA、756型等分光光度計，由於其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點是放大倍數大，因而可以用於檢測微弱光電訊號，而不能用來檢測強光。否則容易產生訊號漂移，靈敏度下降。針對其上述特點，在維修、使用此類儀器時應注意不讓光電倍增管長時間暴露於光下，因此在預熱時，應開啟比色皿蓋或使用擋光桿，避免長時間照射使其效能漂移而導致工作不穩。

6）放大器靈敏度換擋後，必須重新調零。

7）比色皿的配套性問題。比色皿必須配套使用，否則將使測試結果失去意義。在進行每次測試前均應進行比較。具體方法如下；分別向被測的兩隻比色皿裡注入同樣的溶液，把儀器置於某一波長處，石英比色皿：220nm、700nm裝蒸餾水，玻璃比色皿：700nm處裝蒸餾水，將某一個池的透射比值調至100%，測量其他各池的透射比值，記錄其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0。5%的範圍內則可以配套使用，若超出此範圍應考慮其對測試結果的影響。

典型故障及其排除方法

1）儀器不能調零。可能原因：

a）長時間處於工作狀態時，也會工作不穩）。

b）光電管內的乾燥劑失效，使微電流放大器受潮。解決方法：烘烤電路，並更換或烘烤乾燥劑。

c）環境振動過大、光源附近空氣流速大、外界強光照射等。解決方法：改善工作環境。

d）光電管、電路等其它原因。

小結

綜上所述，以下幾個問題應引起儀器操作人員注意：

1）比色皿架及比色皿在使用中的正確到位問題。

有些使用者對這個問題不夠重視，因操作不當造成偶然誤差，嚴重影響分析結果。首先，應保證比色皿不傾斜放置。稍許傾斜，就會使參比樣品與待測樣品的吸收光徑長度不一致，還可能使入射光不能全部透過樣品池，導致測試比準確度不符合要求。其次，應保證每次測試時，比色皿架推拉到位。若不到位，將影響到測試值的重複性或準確度。最後，還應保證比色皿的清潔度，延長其使用壽命。

2）乾燥劑的使用問題。乾燥劑失效將導致：

a）數顯不穩、無法調“0”點或“100%”點（電路或光電管受潮）。

b）反射鏡發黴或沾汙，影響光效率、雜散光增加。鑑於上述原因，分光光度計的放置地點應遠離水池等溼度大的地方、乾燥劑應定期更換或烘烤。

3）儀器的工作環境

應避免陽光直射、避免強電場、避免與較大功率的電器裝置共電、避開腐蝕性氣體等。